在獸醫臨床,我們會發現不同類型的疫苗其抗原含量計量單位有所區別,比如豬瘟疫苗習慣用RID計量,支原體疫苗用CCU計量,本文我們將不同的計量單位做說明與區分。 CCU:顏色改變單位,CCU法通常用于很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,如支原體等。因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透紅色,因此無法用比濁法來計數,并且支原體固體培養很困難,用CFU法也不易計數。 原理是:支原體在特定的培養基中的生長代謝過程將改變培養基的PH,由于添加了酸堿指示劑的原因,培養基將變色,通過將菌液倍比稀釋不同濃度,觀察顏色變化,便可得到該支原體菌液的最大代謝活力的稀釋倍數,即為該菌液的CCU。 CFU:菌落形成單位,豬丹毒、副豬等菌苗常用的計量單位。是指在活菌培養計數時,由單個菌體或聚落成團的多個菌體在固體培養基上生長繁殖所形成的集落,用來表達活菌的數量。菌落形成單位的計量方式與一般的計數方式不同,一般直接在顯微鏡下計算細菌數量會將活與死的細菌全部算入,但是CFU只計算活的細菌。因此,通常將菌液倍比稀釋成不同濃度,每種濃度分別培養計數后,乘以稀釋倍數,取平均值,從而獲得更高的精準度。 RID:兔體感染量,感染一只正常兔子所用的劑量。按照能夠引起兔子出現定型熱的最大稀釋倍數,確定為疫苗的抗原含量。由于豬瘟病毒在細胞上不會出現細胞病變,難以用TCID50測定。而國外使用的豬體半數感染量(PD50),在國內受制于合格實驗豬有限,很難開展,所以國內通常使用兔體感染量,來計量豬瘟病毒。 TCID50:半數組織感染劑量,又稱50%組織細胞感染量,用于計算病毒。表示能導致50%的培養細胞發生病變的病毒量。TCID50所測的不是病毒顆粒的數目,而是病毒感染反應的有或無,嚴格來說,它是一種定性測定法。但是因為感染反應的有或無與病毒顆粒數目之間有一定定量關系,且該法靈敏度高,更為方便,所以廣泛用于病毒的定量測定。不過由于實際操作中是通過不同倍比稀釋后,統計接種細胞出現的病變數量,再運用統計學公式計算得出,所以精準度略差于PFU(空斑試驗)。 PFU:空斑形成單位,計量病毒的一種單位,限用于有產生空斑能力的病毒。與TCID50測定不同的是,其能更精準的表示病毒的實際數量,兼具定性和定量。 原理是:用少量有破壞宿主細胞能力的病毒去感染已經形成的致密單層狀態的宿主細胞群體時,經過一定培養時間,使每個感染細胞周圍的細胞逐漸感染崩潰,形成肉眼可見的空斑。 理論上,一個病毒體可以形成一個空斑,但實際上有不同程度誤差,因此不能準確的與其他計量單位互換,不過通常0.7PFU約等于1.0TCID50。
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